ELISA -menettely alkaa klinikalla, ja potilaalta otetaan verinäyte. Tämän jälkeen suoritetaan useita vaiheita käyttämällä ELISA -testipakkausta laboratoriossa. Testi havaitsee veren vasta -aineiden tai antigeenien esiintymisen sairautta, kuten HIV: tä, vastaan. Vaiheet sisältävät eri aineiden lisäämisen ja pesun, ja tulokset mitataan yleensä värinmuutoksella.
Diagnostisena testinä käytetään entsyymiin liittyvää immunosorbenttimääritystä (ELISA), jota kutsutaan myös entsyymi-immunomääritykseksi (EIA). Se tunnetaan parhaiten HIV: n diagnostisena testinä. Testilevy koostuu yleensä 96 pienestä kuopasta, joihin tietty antigeeni on immobilisoitu. Jos vasta -aine on läsnä seeruminäytteessä, se sitoutuu antigeeniin, mikä mahdollistaa havaitsemisen ELISA -menettelyn eri vaiheiden kautta.
ELISA -menettelyn ensimmäinen vaihe on ottaa näyte potilaalta. Tämän tekee sairaanhoitaja steriileissä olosuhteissa. Veri otetaan yleensä käsivarren tai käden laskimosta. Käsivarteen asetetaan kiristysnyöri, joka turpoaa laskimon ja helpottaa toimenpidettä ja iho puhdistetaan neulan pistoskohdasta. Pieni pistos saattaa tuntua, kun neula menee sisään ja veri kerätään steriiliin putkeen.
Verinäytteen ottamisen jälkeen se siirretään laboratorioon, jossa laboratorioteknikko suorittaa loput ELISA -toimenpiteestä. Verinäyte lisätään ensin ELISA -levyn kuoppiin. Jos spesifinen vasta -aine on läsnä, se sitoutuu antigeeniin. Sitten levy pestään puskurilla sitoutumattomien vasta -aineiden poistamiseksi.
Sitten lisätään toinen normaalisti eläinperäinen vasta-aine, johon on kiinnitetty entsyymi, joka sitoutuu vasta-aine-antigeenikompleksiin. Levy pestään uudelleen ylimääräisen poistamiseksi. Entsyymi on värireaktiivinen, kun substraattia lisätään ELISA-menettelyn lopussa. Värin muutosasteen mittaaminen antaa tuloksen.
ELISA -menettelyä on seurattava huolellisesti väärien tulosten välttämiseksi. Useimpiin ELISA -levyihin sisältyy positiivinen ja negatiivinen kontrolli tällaisten väärien tulosten minimoimiseksi. Kun testataan HIV: tä, positiivista tulosta seuraa yleensä toinen, vahvistava testi, usein erilainen, kuten Western Blot.