Mikä on antibiogrammi?

Antibiogrammitestiä voidaan käyttää kahteen eri tarkoitukseen. Kirby-Bauer-menetelmää käytetään testaamaan bakteerikannan herkkyys eri antibiooteille. Antibiogrammit voivat myös määrittää laimennusmenetelmän avulla pienimmän estävän pitoisuuden (MIC) tai pienimmän antibiootin pitoisuuden, joka estää bakteerikannan kasvua.

Kirby-Bauer-menetelmä on antibiogrammi, jota käytetään määrittämään paras antibiootti käytettäväksi tiettyä bakteerikantaa vastaan. Testit suoritetaan petrimaljoilla, jotka ovat matalia, pyöreitä, peitettyjä astioita, jotka on täytetty agar-väliaineella tai geelimäisellä aineella, johon on lisätty ravinteita bakteerien kasvun edistämiseksi. Testattava bakteerikanta on levitetty tasaisesti levyn pintaan. Useita pyöreitä paperilevyjä, joista jokainen on infusoitu eri antibiootilla, asetetaan tasaisesti levyn pinnan päälle ja työnnetään varovasti alas agariin kosketukseen bakteerien kanssa. Levyjen annetaan sitten kasvaa yön yli inkubaattorissa.

Yön yli inkuboinnin jälkeen pyöreä alue, jossa ei ole bakteereja, ympäröi jokaista paperilevyä. Tätä aluetta kutsutaan estoalueeksi. Kunkin levyn estovyöhykkeen halkaisija mitataan ja verrataan kontrollikaavioon sen määrittämiseksi, onko testattu bakteerikanta resistentti, välituote vai herkkä kullekin eri antibiootille. Suuri estovyöhyke tarkoittaisi, että bakteerikanta on altis testilevyn antibiootille.

Laimennusmenetelmä on antibiogrammi, jota käytetään määrittämään tehokkain antibioottipitoisuus käytettäväksi bakteerikantaa vastaan. Se alkaa viljelemällä tai kasvattamalla uutta testibakteerierää yön yli ja tarkistamalla sitten uusien viljelmien puhtaus tai viljelyn puhdistaminen. Valmistetaan myös kaksi kontrolli- tai vertailubakteeria. Bakteerikannan pitoisuus määritetään spektrofotometrillä ja konsentraatio säädetään laimennusmenetelmää vastaavalle alueelle.

Testattavien antibioottien sarjalaimennus valmistetaan lisäämällä ja asteittain muuttamalla pitoisuutta eri injektiopulloissa. Yksi sarja vaihtelevista antibioottikonsentraatioista ympätään yhtä suurina määrinä testibakteerikantaa ja toinen sarja siirrostetaan kontrollibakteerikannoilla. Kaikkien rokotettujen antibioottikonsentraatioiden annetaan kasvaa yön yli inkubaattorissa tai kunnes näkyvää bakteerikasvua havaitaan joissakin injektiopulloissa. MIC on antibioottipitoisuus, jossa ei näy näkyvää bakteerikasvua. MIC -arvo on kontrolloitu tapa arvioida bakteerikantojen muuttuvaa vastustuskykyä ja asettaa rajat infektioiden antibioottihoidolle.