Mikä on DNA -saostus?

Deoksiribonukleiinihapon (DNA) saostaminen on keskeinen vaihe geneettisen materiaalin eristämisessä ja puhdistamisessa tieteessä. Yleensä biologisen kudoksen näyte sisältää DNA: ta tai RNA: ta muun organismin kehon kanssa. Testatakseen DNA: n tiedemiehen on erotettava DNA kaikista muista aineista. DNA: n saostaminen viittaa erityisesti vaiheeseen, joka sisältää liuenneen DNA: n erottamisen nesteestä, johon se on liuotettu. Yleisiä DNA -saostusmenetelmiä ovat etanolin, ispropanolin tai glykogeenin lisääminen nesteeseen, mikä saa DNA: n kiinteytymään möykkyinä ja putoamaan nestenäytteen pohja.

Alkuvaiheet DNA: n puhdistamiseksi näytteestä voivat olla yhtä yksinkertaisia ​​kuin lehtien murskaaminen kulhoon osan rakenteen hajottamiseksi. Sitten mash voidaan hajottaa kemikaaleilla tai entsyymeillä, jotka jättävät DNA: n ehjäksi. Yleensä geneetikot käyttävät sentrifugia näytteen eri komponenttien jakamiseen. Tämä on kone, joka pyörittää näytteen niin, että raskain komponentti vajoaa pohjaan ja kevyin nousee ylös.

Poistamalla erilaiset ei -toivotut komponentit geneettiselle tutkijalle jää yleensä kirkas neste, joka sisältää geneettistä materiaalia. Hänen on sitten otettava pois nesteeseen liuotettu DNA ja hävitettävä neste ja muut nesteessä olevat aineet. DNA -saostuminen on tapa, jolla tämä saavutetaan. Useimmiten tutkijan on lisättävä kemikaali nesteeseen DNA -saostamiseksi.

Etanoli tai isopropanoli, jotka ovat molemmat alkoholimuotoja ja kuuluvat kemikaalien liuotinryhmään, ovat yleisimpiä kemikaaleja, joita käytetään DNA: n saostamiseen. Glykogeeni on toinen aine, joka voi saostaa DNA: ta, mutta sitä käytetään harvemmin, lukuun ottamatta geneettisen materiaalin saostumista. Kun nämä kemikaalit sekoittuvat liuenneen DNA: n kanssa, niiden kemian ansiosta ne voivat muuttaa tapaa, jolla DNA sopii ympäristöönsä. Kun aiemmin DNA sekoittui helposti nesteen kanssa, kemiallisen lisäyksen jälkeen se lakkaa sitoutumasta nesteeseen ja muodostuu kiinteäksi aineeksi.

Tämä kiinteä aine on tavallisesti vaalea ja kasautuu yhteen. Koska osa kiintoaineesta on kuitenkin edelleen pieniä hiukkasia, tiedemies yleensä sijoittaa näytteen sentrifugiin, jossa kaikki kiintoaineet pyöritetään yhdessä pelletiksi näyteputken pohjassa. Tämä on näytteessä alun perin olevan DNA: n puhdistettu muoto, joka on hyödyllinen testauksessa. Yleensä neste, johon pelletti suspendoidaan, poistetaan putkesta, ja pelletti voidaan myös kuivata kemikaalien haihtumisen sallimiseksi, jotta pelletti saadaan mahdollisimman puhtaana.