ELISA-määritys on testausprosessi, joka havaitsee aineita tiettyjen sairauksien, allergioiden ja laittomien lääkkeiden tunnistamiseksi kehossa. Sitä tiedetään myös käytettävän ihmisen immuunikatoviruksen (HIV) havaitsemiseen. Jotkut sen havaitsemista aineista ovat vasta-aineita, hormoneja ja proteiineja. ELISA-määrityksen pääperiaate on, että kemiallinen reaktio potilaan nestenäytteen ja tietyn laboratorionäytteen välillä osoittaa tietyn aineen esiintymisen, joka liittyy tiettyyn sairauteen tai lääketieteelliseen tilaan. ELISA, lyhenne, tarkoittaa “entsyymi-immunosorbenttimääritystä”.
ELISA-määrityksen keksintö ja kehitys syntyivät, koska tarvittiin muita turvallisempia testausmenetelmiä kuin radioimmunomääritys, joka käyttää radioaktiivisuutta kemiallisen reaktion aikaansaamiseen. 1960-luvulla kaksi erillistä tiederyhmää, joita johti Stratis Avrameas ja GB Pierce, onnistui yhdistämään tiettyjä vasta-aineita tiettyjen entsyymien kanssa ja tuottamaan yhdistelmästä kemiallisen reaktion. Tämän tiedon avulla kaksi Tukholman yliopiston tutkijaa, Peter Perlmann ja Eva Engvall, keksivät ELISA-menetelmän ja julkaisivat kokeensa ja määrityksen taustalla olevan järjestelmän vuonna 1971. Siitä lähtien ELISA-määritystä on käytetty maailmanlaajuisesti, vaikka radioimmunomääritys on edelleen saatavilla halvemman hintansa vuoksi.
On olemassa kaksi yleistä ELISA-määritystyyppiä: suora ja epäsuora menetelmä, jälkimmäistä käytetään yleisemmin. Ensimmäinen vaihe olisi ottaa potilaasta näyte, yleensä veri tai virtsa, jotka molemmat voidaan läpikäydä erotusprosessin vasta-aineita sisältävän kirkkaan seerumin uuttamiseksi. ELISA-pakkaus sisältää usein levyn, jossa on 96 minisäiliötä, joita kutsutaan “kuopiksi”, jotka päällystetään antigeenillä, joka voi mahdollisesti reagoida olemassa olevaan vasta-aineeseen. Antigeeniä pidetään usein vieraana aineena, jota elimistö hyökkää tuottamalla spesifisiä vasta-aineita, joten jos potilas on hankkinut antigeenin tietystä sairaudesta, hänen seeruminsa tulee sisältää vasta-aineita, jotka vastaavat mainittua antigeeniä.
Potilaan seerumi kaadetaan sitten kuoppiin ja sitten inkuboidaan, jotta vasta-aineet tarttuvat proteiinipäällysteeseen. Inkubointijakson jälkeen kuopat huuhdellaan pois seerumin ja muiden vasta-aineiden, jotka eivät ole sitoutuneet pinnoitteeseen, poistamiseksi. Toinen joukko eläimistä, yleensä rotista, uutettuja vasta-aineita kaadetaan kuoppiin ihmisen vasta-aineiden havaitsemiseksi, ja toinen inkubaatiojakso tapahtuu ja eläinvasta-aineet pestään uudelleen pois. Sitten lisätään entsyymisubstraattia, jotta reaktio voidaan nähdä näkyvästi väreinä. Yleensä voimakas värisävy osoittaa positiivisen tuloksen, mikä tarkoittaa, että potilaalla on sairaus tai muut sairaudet testattu.