Mikä on pyrogeenitestaus?

Pyrogeenitestillä määritellään lääkevalmistajien käyttämä prosessi sen määrittämiseksi, ovatko bakteerimyrkyt rokotteissa ja lääkkeissä, jotka voivat aiheuttaa kuumetta, kun niitä käytetään ihmisillä. Se määrittää, onko mikrobeja tai niiden metaboliitteja läsnä laskimonsisäisissä liuoksissa valmistusprosessin aikana. Yleisin ja vanhin pyrogeenitestin muoto koostuu lääkkeiden pistämisestä kaneihin sen määrittämiseksi, kehittyykö kuume. Uudempi testi käyttää hevosenkengänrapun verta toksiinien testaamiseen.

Kanin pyrogeenitestausmenetelmä tuli esiin 1940 -luvulla sen jälkeen, kun jotkut potilaat sairastuivat suonensisäisistä lääkkeistä. Hypodermiset laitteet osoittautuivat hyödyllisiksi lääkkeiden antamisessa suoraan verenkiertoon potilaille, jotka eivät kyenneet sietämään suun kautta otettavia lääkkeitä. Vaikka ihonalaiset laitteet olivat steriilejä, lääkkeet eivät aina olleet turvallisia.

Potilaille kehittyi joskus korkeita kuumeita, vilunväristyksiä ja kehon kipuja, ja jotkut ihmiset kärsivät shokista. Lääkärit eivät tienneet, miksi tämä tapahtui, kutsuen tilan usein injektiokuumeeksi, suolaliuoskuumeeksi tai tislatun veden kuumeksi. Tutkijat havaitsivat myöhemmin, että jotkut lääkkeet ja rokotteet saastuivat tuotantolaboratorioissa pyrogeenisten endotoksiinien, voimakkaiden bakteerien kanssa, jotka kestävät sterilointia.

Ihmiskeho torjuu altistumista ympäristön bakteerimyrkkyille ihon kautta. Kun saastuneet lääkkeet ruiskutetaan verenkiertoon, toksiinit ohittavat normaalit puolustusmekanismit. Valkosolut alkavat vapauttaa toisen pyrogeenin muodon, joka aiheuttaa korkean kuumeen, mikä voi johtaa sokkiin ja kuolemaan.

Pyrogeenitestissä lääkelaboratorioissa käytetään lämmityslaitteita, joita käytetään steriloinnin varmistamiseen. Lääke ruiskutetaan kanien korvalaskimiin nähdäkseen, kehittyykö kuume. Koe -eläinten peräsuolen lämpötilat analysoidaan 30 minuutin kuluttua ja uudelleen yhden tai kolmen tunnin kuluttua. Jos eläimet ovat kuumeettomia, liuoksessa ei ole myrkkyjä.

Eläinten pyrogeenitestausprosessi sisältää tyypillisesti useiden kanien ruiskuttamisen kerralla 10 minuutin kuluessa. Kunkin kanin annostus riippuu ruumiinpainosta, iästä ja sukupuolesta. Samaa kanien ryhmää voidaan testata toistuvasti muutaman päivän välein, kunnes niille kehittyy toleranssi lääkkeille.
Uudempaa pyrogeenitestimenetelmää kutsutaan limulus amoebocyte lysate (LAL) -testiksi. Hevosenkengänrapujen veri sisältää suuria määriä myrkkyjä, joita luonnossa esiintyy meressä. Tutkijat löysivät tavan käyttää verta testatakseen bakteeritoksiinia lääkkeissä ja lääkkeiden valmistuksessa käytettäviä raaka -aineita. LAL -pyrogeenitestimenettely voi olla 100 kertaa herkempi kuin kanin testausmenetelmät. Ihmisiin istutetut lääkinnälliset laitteet käyvät läpi LAL -testin sekä radioaktiiviset lääkkeet ja anestesian.