RNA -monistus on prosessi, joka ottaa muutaman kopion osasta ribonukleiinihappoa (RNA) ja luo tuhansia kopioita, jotka ovat koostumukseltaan identtisiä. RNA-palaset ovat makromolekyylejä, jotka koostuvat nukleotidijonoista, joten monistaminen on monivaiheinen prosessi, joka sisältää tarkan nukleotidisekvenssin toistamisen RNA-palasta. RNA -monistus on hyödyllinen tutkimuksessa, johon liittyy viruksia, joiden geneettinen materiaali voidaan tallentaa muistin RNA: ksi (mRNA) DNA: n sijasta; geenien ilmentymisen tutkimus organismeissa; ja proteiinien luominen transkriptionaalisesta RNA: sta (tRNA). RNA: n monistamiseksi luodaan ja monistetaan täydentävä sekvenssi, jota käytetään sitten mallina RNA -kopioiden luomiseen. RNA: n monistamiseen tarvitaan DNA-välittäjää, koska RNA esiintyy yleensä vain yksijuosteisessa, parittomassa muodossa, joten RNA-transkriptaasientsyymin on luotava DNA-templaatti; RNA: ta ei voida kopioida itsestään.
Kiinnostava RNA -sekvenssi on ensin eristettävä epäpuhtaasta materiaalista ennen RNA -monistamisen aloittamista. Tämän jälkeen entsyymikäänteistranskriptaasi lisätään RNA -templaattiin. Käänteistä transkriptaasia käytetään luomaan alkuperäisen mRNA: n komplementaaristen emäsparien solu -DNA (cDNA) -sekvenssi. Tätä ensimmäistä cDNA -juosetta voidaan sitten käyttää luomaan toiset cDNA -juosteet, joita voidaan käyttää polymeraasiketjureaktiossa, prosessissa, joka monistaa DNA -juosteita toistuvilla DNA -replikaatiosykleillä ja kahden juosteen erottamisella. CDNA sisältää tavallisesti alukkeita tai entsyymejä DNA -sekvenssin toisessa päässä, jotka toimivat signaaleina nukleotidisitoutumiselle ja siten alkuperäisen sekvenssin kanssa identtisten mRNA -juosteiden tuottamiselle.
RNA: n monistamismenetelmiä on olemassa, mutta menetelmää, joka tuottaa suurimman määrän alkuperäistä kopiota vastaavaa mRNA: ta, kutsutaan mallinvaihtomenetelmäksi. Tämä menetelmä käyttää käänteiskopioijaentsyymiä Moloney-hiiren leukemiaviruksesta, joka lisää alukealueen ensimmäisen juosteen cDNA: n päähän tämän juosteen luomisen jälkeen RNA-templaatista. Tämä alukealue lisätään myös cDNA: n toiseen juosteeseen, josta valmistetaan monistettuja RNA -kopioita. Toinen entsyymi, jota kutsutaan promoottoriksi, voidaan sitoa cDNA: n toisen juosteen alukealueeseen, mikä lisää merkittävästi tästä cDNA -juosteesta transkription avulla tuotettujen RNA -kopioiden määrää.