Sisäinen standardi on tunnettu määrä kemiallista ainetta, joka on lisätty analyyttiseen näytteeseen, jonka avulla teknikot voivat kalibroida laboratoriolaitteita. Tämä mahdollistaa myös tuntemattomien kemikaalien määrien laskemisen, koska laite näyttää tunnetun standardin määrän viitteenä. Testit, joista voi olla hyötyä sisäisestä standardista, sisältävät kaasu- ja nestekromatografian.
Kaasukromatografia johtaa höyrystyneen näytteen pylvään läpi, joka on täytetty kiinteällä, erittäin puhtaalla maaperällä. Näyte siirretään pylvään läpi inertillä tai ei-reaktiivisella kaasulla, kuten typellä tai argonilla. Erilaiset molekyylit imeytyvät pylvääseen ja vapautuvat sitten niiden molekyylirakenteen perusteella. Kaasu kuljettaa sitten erotetun näytteen liekille muodostaen ioneja tai molekyylejä, joilla on pieniä sähkövarauksia. Ilmaisin määrittää kunkin ionin määrän ja piirtää tulokset kaavioon.
Nestekromatografia myös erottaa näytteet eri molekyyleiksi, mutta käyttää nestemäistä liuotinta näytteen siirtämiseen painovoiman tai paineen avulla kiinteän materiaalin poikki. Kromatografiakerrosmateriaali voi olla hartsi, piimaa tai jopa jokin muu neste. Näyte ladataan ylhäältä ja liuotin lisätään näytteen työntämiseksi alas pylväsmateriaalin läpi.
Näytteen osat kulkevat pylvään läpi eri nopeuksilla molekyyli- tai ioniominaisuuksien perusteella. Pieniä nesteenäytteitä, joita kutsutaan alikvooteiksi, otetaan säännöllisin väliajoin kolonnin pohjasta. Nämä näytteet sisältävät eri molekyylit, jotka ovat eronneet sarakkeeseen, ja ne analysoidaan niiden koostumuksen määrittämiseksi.
Molemmissa kromatografiatyypeissä monet muuttujat voivat vaikuttaa tuloksiin. Kantokaasun virtausnopeus voi muuttua hieman tai kolonnit voivat olla eri lämpötiloissa eri näytteille. Kalibroidun sisäisen standardin lisääminen antaa tunnetun tuloksen jokaiselle koelaitteeseen sijoitetulle näytteelle. Jos jokin instrumentin muuttuja, kuten kaasun virtausnopeus, muuttuu pienellä prosenttiosuudella, standardi muuttuu saman verran.
Kun laite on kalibroitu suorittamalla näyte sisäisellä standardilla, tuntematon kemiallinen näyte voidaan ajaa saman laitteen läpi standardin mukana. Tulokset osoittavat tuntemattoman kemiallisen koostumuksen ja sisäisen standardin, jotka on piirretty instrumentin luomaan kaavioon. Kun tiedetään sisäisen standardin määrä, voidaan määrittää tuntemattoman kemikaalin suhteellinen määrä, mikä mahdollistaa pitoisuuden laskemisen.
On tärkeää huomata, että sisäistä standardia ei käytetä kemialliseen reaktioon minkään näytteen kanssa. Pikemminkin sitä käytetään minkä tahansa tuntemattoman materiaalin molekyylien vertaamiseen standardin tunnettuun määrään. Tämä tekniikka tunnetaan yhden muuttujan asettamisena, koska tunnettu standardi pysyy aina samana näytteestä toiseen, riippumatta muista olosuhteista, jotka voivat muuttua.