Mikä on solusyklianalyysi?

Solusyklianalyysi on tekniikka, jota käytetään biokemiallisessa tutkimuksessa biologisen solun vaiheen tunnistamiseen ja analysointiin. Elinikänsä aikana solu käy läpi sarjan syklisiä vaiheita, jotka yhdessä tunnetaan solusyklinä. Deoksiribonukleiinihapon (DNA) määrä solussa muuttuu vaiheen mukaan. Solusyklianalyysissä solun DNA värjätään fluoresoivalla väriaineella, jolloin tutkijat voivat määrittää, kuinka paljon DNA:ta on läsnä ja missä solu on syklissään.

Solusykli koostuu kahdesta laajasta vaiheesta: interfaasista ja mitoosista. Interfaasi koostuu valmistautumisesta solun jakautumiseen eli mitoosiin, jota kutsutaan myös M -vaiheeksi. Suurin osa solun elinkaaresta kuluu valmistautumiseen mitoosiin, mikä on lyhyt vertailuun, joten interfaasi on jaettu kolmeen osaan: G1 -vaihe, S -vaihe ja G2 -vaihe.

G1:ssä solu on pääasiassa huolissaan kasvusta. S-vaiheen aikana solun geneettinen informaatio DNA-muodossa replikoituu valmisteltaessa sen jakautumista kahdeksi tytärsoluksi. G2:ssa solu valmistautuu jakautumiseen, mikä johtaa M-vaiheeseen. Mitoosin jälkeen solu palaa interfaasin G1-osaan ja sykli alkaa uudelleen. Solut, jotka jostain syystä lakkaavat jakautumasta, poistuvat syklistä ja elävät inertisti niin sanotussa G0-vaiheessa.

Solu toistaa DNA: ta S -vaiheen aikana, joten solussa on kaksi kertaa enemmän DNA: ta G2: n ja M: n aikana kuin G1: ssä tai G0: ssa. Tutkijat käyttävät näitä tietoja solusyklianalyysissä soluvaiheen määrittämiseksi. Solusyklianalyysi voi myös paljastaa poikkeavuuksia solun DNA: ssa.

Solusyklianalyysissä käytetty tekniikka tunnetaan virtaussytometriana. Ensinnäkin soluun tuodaan fluoresoiva väriaine, joka värjää DNA -molekyylit sitoutumalla niihin kemiallisesti. Tutkijat käyttävät sitten sytometriksi kutsuttua laitetta solun fluoresenssin voimakkuuden määrittämiseksi. Korkeampi fluoresenssi osoittaa, että enemmän väriainetta pystyi sitoutumaan, ja se osoittaa, että solussa on enemmän DNA: ta.

Yleensä solusyklianalyysiä käytetään solujen ryhmittelyyn. Tiedoista luodaan histogrammi-niminen kaavio, jossa on usein kaksi erillistä huippua: toinen, joka näyttää G1-vaiheen solujen populaation, ja toinen – kaksi kertaa korkeampi – G2-vaiheessa olevat. G2-faasin huippu on kaksi kertaa korkeampi, koska tämän populaation solut sisältävät kaksi kertaa enemmän DNA:ta kuin G1-huipun solut. S-vaiheessa olevat solut, jotka ovat edelleen DNA:n replikaatioprosessissa, näkyvät kaaviossa kahden piikin välissä.