Mikä on transfektioreagenssi?

Transfektioreagenssi on DNA: n kantaja, jota tutkija voi käyttää DNA: n lisäämiseen viljelmän soluihin. Biotieteiden yritysten kautta on saatavana useita erilaisia ​​reagensseja, ja tutkijat voivat myös kehittää omia mukautettuja sovelluksia varten. Nämä molekyylit voivat toimia monella eri tavalla kuljettamaan DNA: ta kohdesoluihin ja insertoimaan sen genomiinsa. Tyypillinen prosessi sisältää halutun DNA: n sekoittamisen reagenssin kanssa, sen lisäämisen viljelmän soluihin, inkuboinnin ja sen jälkeen niiden seulonnan sen selvittämiseksi, mikä sisältää uuden DNA: n.

DNA -transfektio on erittäin tärkeä tutkimusväline. Tutkijat voivat lisätä geneettistä materiaalia geenien käynnistämiseksi tai hiljentämiseksi ja voivat käyttää transfektiota pakottaakseen solut viljelmään toimimaan tietyllä tavalla. Tavoitteena voi olla ohimenevä geneettinen ilmentyminen tutkimusta varten. Se voi myös olla pysyvä muutos, jonka avulla tutkija voi luoda pesäkkeen kloonatuista soluista, jotka kaikki ilmentävät samaa geeniä. Näitä soluja voidaan käyttää tutkimuksessa ja niillä voi olla terapeuttisia sovelluksia.

Kalsiumfosfaatti on yksi vanhimmista transfektioreagensseista. Tutkijat käyttävät myös lipidipohjaisia ​​materiaaleja, jotka ovat yleensä erittäin tehokkaita. Ne voivat myös käyttää virus -DNA -vektoreita sekä mekaanisia menetelmiä, kuten mikroinjektioita, joissa haluttu DNA ruiskutetaan suoraan materiaalin hajoamisriskin vähentämiseksi. Geenipistoolit ovat toinen suosittu työkalu DNA -transfektioon.

Kun tutkija valitsee transfektioreagenssin, on useita näkökohtia. Näitä ovat muun muassa reagenssin käyttö, millainen DNA on mukana ja millaisia ​​vaikutuksia tutkija haluaa. Transfektioreagenssi ei ole aina täysin luotettava, ja tutkija tarvitsee myös hyvän seulontatyökalun onnistuneesti transfektoitujen solujen löytämiseksi ja eristämiseksi. Tämän avulla tutkijat voivat hylätä solut, jotka eivät hyväksyneet uutta geneettistä materiaalia yhdessä solujen kanssa, jotka hyväksyivät, mutta ilmaisevat sen epätavallisella tavalla, joka viittaa siihen, että DNA: n hajoaminen on saattanut tapahtua.

DNA -transfektioreagenssiluetteloita on saatavana biotieteen yrityksiltä. Useimmilla on kaavio, joka auttaa tutkijoita päättämään, mitä käyttää, solutyypin ja millaisen geneettisen materiaalin perusteella tutkija haluaa lisätä. Tutkijat voivat yleensä pyytää näytteitä, jotta he voivat testata reagenssin ennen sitoutumista sen käyttöön tutkimuksessa. On tärkeää lukea asiakirjat huolellisesti varmistaaksesi, että transfektioreagenssin toiminta ymmärretään täysin ennen käyttöä.