ELISA tarkoittaa entsyymiin liittyvää immunosorbenttimääritystä ja on tekniikka, jossa käytetään vasta-aineita ja antigeenejä. Yleensä käytetään tartuntatautien tunnistamiseen, ELISA -sarjat edellyttävät näytteen, kuten veren, sekoittamista kaupallisesti saatavilla olevaan testiin. Jokainen testi on spesifinen tietylle organismille, ja sarja antaa positiivisen tai negatiivisen reaktion ja diagnosoi siten kyseisen taudin infektion.
Ihmisen immuunijärjestelmä käyttää vasta -aineiksi kutsuttuja molekyylejä tunnistaakseen vieraat hyökkääjät tai vieraiden hyökkääjien osat, joita kutsutaan antigeeneiksi. Heti kun immuunijärjestelmä havaitsee antigeenin läsnäolon, se luo lisää vasta -ainemolekyylejä, jotka tunnistavat spesifisesti antigeenin. Nämä vasta -aineet sitoutuvat antigeeniin ja ilmoittavat sen tuhoavan muun immuunijärjestelmän.
Jos henkilö altistuu tietylle organismille, hän kehittää vasta -aineita tälle organismille. Nämä vasta -aineet voivat liikkua verenkierrossa koko elämän ajan suojatoimenpiteenä tulevia infektioita vastaan. Ihmisillä, joilla on jo olemassa olevia tartuntatauteja, on veressä myös vasta -aineita kyseistä tautia vastaan. Vasta -aineilla ja antigeeneillä on taipumus olla erittäin spesifisiä, vaikka joskus vasta -aine voi tunnistaa myös muita antigeenejä, jotka ovat läheisesti sukua alun perin merkitylle antigeenille.
Tämä immuunijärjestelmän antigeenitunnistus voidaan kopioida kaupallisiin ELISA -sarjoihin. Jos sarja sisältää joko vasta -ainetta tai antigeenia, näyte, joka sisältää kohteen tai kohdistusmolekyylin, sitoutuu pakkauksessa olevaan aineeseen. Vastakkaisten molekyylien sitoutuminen osoittaa yleensä etsityn organismin läsnäolon, mutta tätä sitoutumista ei ole helppo nähdä.
Tilanteen luomiseksi, jossa vasta -aineen sitoutuminen antigeeniin voidaan mitata, ELISA -sarjoihin on lisättävä enemmän aineita. Yleensä tämä on värimerkki, joka muuttaa väriä vain tietyissä olosuhteissa. Analyytikko voi lukea valmiita ELISA -sarjoja ja määrittää näytteiden värin perusteella antigeenin tai vasta -aineen läsnäolon tai puuttumisen.
Valmistajat valmistavat muovilevyn, jossa on kuoppia, jokaisen ELISA -sarjan pohjaksi. Tuotantoprosessin aikana kunkin kuopan sisäpinta on päällystetty tietyn organismin antigeenillä, kuten hepatiitti B -viruksen proteiinilla. Kaivolevyn lisäksi sarja sisältää kaksi muuta ainetta.
Yksi on aine, joka koostuu entsyymistä, joka on kiinnitetty vasta -aineeseen. Tämä ylimääräinen vasta -aine tarttuu erityisesti vasta -aineeseen, jonka sarja on suunniteltu havaitsemaan. Joten positiivisen testisyklin aikana kuoppien antigeeni tarttuu näytteessä olevaan tunnistettuun taudin vasta-aineeseen ja entsyymi-vasta-aine tarttuu näytteen vasta-aineen toiseen päähän.
Tekniikan viimeisenä vaiheena analyytikko pesee pois kaiken, joka ei ole kiinnittynyt kuoppaan, jättäen vain sitoutuneet molekyylit. Jos entsyymi-vasta-ainekompleksi ei löytänyt vasta-ainetta kiinni, se pesee pois muiden löysien molekyylien kanssa. Sitten hän lisää substraatin kaivoihin. Vasta -aineeseen kiinnittynyt entsyymi vaikuttaa substraattien kemikaaleihin, hajottaa ne ja tuottaa eri värisubstraatin. Kone voi lukea tämän värinmuutoksen positiiviseksi tai negatiiviseksi testiksi taudinaiheuttajalle.