Laboratoriokokeita, jotka mittaavat entsyymitasoja ja entsyymiaktiivisuutta, kutsutaan entsyymimäärityksiksi. On olemassa monenlaisia mittausmenetelmiä, jotka mittaavat entsyymiaktiivisuuden nopeutta ja entsyymin estoa. Entsyymit ovat molekyylejä, jotka manipuloivat muita molekyylejä, joita kutsutaan substraateiksi, sitoutumalla niihin ja reagoimalla kemiallisesti niiden kanssa tuottaakseen useita sivutuotteita. Testit, jotka mittaavat tätä aktiivisuutta, ovat eri tarkoituksiin tiettyjen sairauden oireiden mukaan, ja niissä otetaan huomioon entsymaattisten prosessien eri vaiheet.
Entsyymin kinetiikkaa tutkivat testit osoittavat, kuinka paljon enemmän tai vähemmän normista entsyymikäyttäytyminen todellisuudessa on. Entsyymimäärityksiä tehtäessä on valvottavia tekijöitä, kuten entsyymit toimivat tietyllä tavalla elimistön sisältämien lämpötilojen mukaan, eivätkä entsyymit voi sietää korkeita suolapitoisuuksia, koska liika suola häiritsee entsyymin kykyä sitoutua muihin proteiineihin. Monet entsyymit voivat toimia vain pienellä pH -alueella; siksi kehon pH -arvot on myös mitattava. Korkea pH voi estää entsyymiaktiivisuuden kokonaan.
Entsyymimäärityksiä on kahta päätyyppiä: jatkuva, jossa mitataan jatkuvasti, ja epäjatkuva, jolloin jonkin ajan kuluttua kemiallinen reaktio häiriintyy ja substraatin ja sivutuotteiden pitoisuudet mitataan. Jatkuvissa määrityksissä testataan NADH -nimisen substraatin, joka vaikuttaa aineenvaihduntaan, tai NADPH: n tasoja, jotka vaikuttavat kehon kykyyn reagoida hyvin lääkehoitojen kanssa, käytetään spektrofotometristä määritystä, koska ne näkyvät sen ultraviolettivalon (UV) alla säteet. Mitä kutsutaan fluorometrisiksi määrityksiksi, määrittävät erot fluoresenssissa joissakin entsyymisubstraateissa. Kalorimetriset määritykset mittaavat lämmön määrää entsyymikemiallisten reaktioiden aikana ja kemiluminesenssimääritykset mittaavat kemiallisten reaktioiden aikana syntyvää valoa ja voivat havaita sairauksien vasta -aineita. Epäjatkuvissa määrityksissä radiometrisillä testeillä voidaan mitata radioaktiivisuuden imeytymistä tai vapautumista, kun proteiinit ja substraatti sitoutuvat, ja kromatografiset määritykset mittaavat entsyymisubstraattisidosten sivutuotteiden muodostumista.
Jotkut verikokeet suoritetaan usein tiettyjen entsyymitasojen testaamiseksi sydämen vaurioiden määrittämiseksi. On olemassa tietty määrä useita proteiineja, joita esiintyy veressä suurempina määrinä, kun esimerkiksi sydänlihas vaurioituu. Nämä testit on suoritettava huolellisesti, koska munuaissairaus voi myös johtaa lähes samoihin entsyymipitoisuuksiin. Toinen sairaus, joka tunnetaan pahanlaatuisena verenpaineena, voi johtaa kohonneisiin sydämen entsyymitasoihin; siksi muita testejä kuin entsyymimäärityksiä tarvitaan korkeiden entsyymitasojen todennäköisen syyn määrittämiseksi.